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大鼠磷脂酶A2(PL-A2)ELISA免費代測試劑盒操作步驟

發(fā)布時間:2025-02-02
大鼠磷脂酶a2(pl-a2)elisa免費代測試劑盒操作步驟:
1. 標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設(shè)標準品孔10孔,在di一、第二孔中分別加標準品100μl,然后在di一、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻;然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為180 ng/l,120 ng/l ,60 ng/l,30 ng/,15 ng/l)。
2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將30(48t的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48t的20倍)倍稀釋后備用。
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑a50μl,再加入顯色劑b50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(od值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘。
mirna尿素-page上樣液(1.5 ml)
mirna尿素-page上樣液(10 ml)
三合一rna上樣液(a型)
三合一rna上樣液(b型)
核酸染料
sybr green ⅱ核酸染料
超快核酸銀染試劑盒
電泳級sybr green i
電泳級耐熱型sybr染料
綠如藍核酸染料(uv)(0.5 ml)
綠如藍核酸染料(uv)(1.5 ml)
綠如藍核酸染料(可見光型)
溴化乙錠干粉
溴化乙錠清除劑(eb清除劑)
溴化乙錠溶液(1.5 ml)
核酸分子量標準
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dna電泳分子量標準2(dna marker)(50-400 bp)
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dna電泳分子量標準系列(dna marker)(100-5000bp)
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