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單光子探測器在熒光壽命測量方向的應用

發(fā)布時間:2025-02-15
單光子探測器在熒光壽命測量方向的應用 基于近場或共聚焦顯微鏡的熒光壽命測量在生物化學和分析化學、醫(yī)學、藥理學、光物理和光化學以及環(huán)境研究等各個領域都有應用。在過去的幾年里,我們見證了用時間相關單光子計數技術(tcspc)對單分子熒光檢測(smd)的巨大前景。在單分子熒光檢測應用中,被檢測的分子被熒光標記,通過重復的激光激發(fā),熒光分子在基態(tài)和激發(fā)態(tài)之間循環(huán)。激發(fā)態(tài)存在的時間是有限的,即熒光壽命,在此期間能量部分耗散,直到達到弛豫(產生熒光)的單線激發(fā)態(tài)。然后,熒光團通過發(fā)射波長為熒光的光子返回基態(tài)。經過多次激發(fā)脈沖后,得到熒光壽命,即熒光團處于激發(fā)態(tài)的平均時間,從而可以對分子進行識別。下面我們介紹下id quantique公司的id100-20(見圖1)在熒光壽命測量中的應用及特點。
圖1 id100-20
一個典型的熒光衰減時間測量方案(見圖2),包括脈沖激光二極管,與之匹配的的擴束透鏡,顯微鏡物鏡聚焦激發(fā)光束和收集發(fā)射的熒光光子,一組合適的鏡頭觀測id100-20感光區(qū)域和一個以λfluo為中心帶通濾波器。時間—數字轉換器(tdc)或時間—振幅轉換器結合多通道分析儀,測量激光激發(fā)和熒光光子發(fā)射之間的時間。逐步建立直方圖,獲得熒光衰減時間。
圖2 熒光壽命測量的典型方案
id100-20的優(yōu)點:
1.出色的同步分辨率為40ps半高寬(見圖3)
與光電倍增管和其他商用光子計數模塊相比,這是一個顯著的改進。這種出色的特性允許測量幾十皮秒的極短熒光壽命。此外,這一優(yōu)點使得高分辨率的多組分熒光衰減時間實驗成為可能。
圖3 id100-20時間分辨率
2.大范圍的探測效率
id quantique的id100-20具有覆蓋整個可見光范圍(400到750nm)的單光子靈敏度,其中對于綠色波段為峰值探測效率,適用于生命科學中使用的大多數熒光團,id100-20光子探測效率比標準pmt更好。
3. 70ns的死區(qū)時間
大頻率為14mhz。因此,可以在很短的時間內恢復直方圖。
4.低暗計數
包括通常會影響測量信噪比的后脈沖和暗計數。通過將有效區(qū)直徑限制在20毫米,從而減小暗計數和后脈沖率。因此,需要仔細研究光學裝置,以便將熒光聚焦到探測器的有效區(qū)域。id quantique建議使用可用的安裝支架將id100-20安裝在3軸平移臺上。因此,能夠實現準確對準,并且只需要一次。id quantique還提供id100-20的光纖耦合版本,帶有50μm芯多模光纖。
5.設計緊湊,可靠性高
id100-20不會被環(huán)境光損壞,并且由于不需要冷卻,因此可以立即運行。
id quantique (idq)公司位于瑞士,致力于量子傳感和量子密碼解決方案領域。西安立鼎光電是idq公司的中國區(qū)代理商,負責其單光子產品的市場推廣及技術支持。
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