服務(wù)介紹：
edu(5-ethynyl-2’- deoxyuridine)是一種胸腺嘧啶核苷類似物，能夠在細胞增殖時期代替胸腺嘧啶(t)滲入正在復(fù)制的dna分子中，通過基于edu與apollo®熒光染料的特異性反應(yīng)快速檢測細胞dna復(fù)制活性，適用于細胞增殖、細胞分化、生長與發(fā)育、dna修復(fù)、病毒復(fù)制、細胞標記示蹤等方面。
實驗結(jié)果展示：
實驗流程： 1.每孔加入2 mg/mlglycine，脫色搖床孵育5分鐘后，棄glycine溶液;
注：作用是中和多聚甲醛，當采用其他方式進行細胞固定時可省略此步驟;
2.每孔加入100 μl pbs，脫色搖床清洗5分鐘，棄pbs;
3.每孔加入100μl滲透劑(0.5% tritonx-100的pbs)脫色搖床孵育10分鐘;pbs清洗1次，5分鐘。
注：當實驗需要進行其他抗體染色，或由于某些細胞類型對染料的吸附性較高，可能需要增強細胞膜通透性。
4.每孔加入100 μl的1x apollo®染色反應(yīng)液，避光、室溫、脫色搖床孵育30分鐘后，棄染色反應(yīng)液;
5.加入100 μl滲透劑(0.5% tritonx-100的pbs)脫色搖床清洗2~3次，每次10分鐘，棄滲透劑;
6.(加強)每孔每次加入100 μl甲醇清洗1~2次，每次5分鐘;pbs清洗1次，每次5分鐘。
注：由于某些細胞對染料的吸附性較高，需采用加強方式洗脫以降低染料背景。
染dapi，封片，鏡檢。
樣本運輸要求： 1.組織樣本放置于20倍樣本體積的固定液中固定24h以上，常溫運輸送樣。2.石蠟切片常溫保存運輸
3.冰凍切片-20℃保存運輸
4.細胞爬片固定液浸泡，4℃保存運輸
關(guān)鍵詞：脫色搖床