原理
茶葉中多酚類物質(zhì)能與亞鐵離子形成紫藍(lán)色絡(luò)合物。用分光光度法測(cè)定其含量。
儀器和用具
實(shí)驗(yàn)室常規(guī)儀器及下列各項(xiàng):分析天平: 感量0.0001g。分光光度儀。
試劑和溶液
所用試劑應(yīng)為分析純(ar),水為蒸餾水。
1.酒石酸亞鐵溶液:稱取1g (準(zhǔn)確至0.0001g) 硫酸亞鐵和5g (準(zhǔn)確至0.0001g)酒石酸鉀鈉,用水溶解并定容至1l(溶液應(yīng)避光,低溫保存,有效期一個(gè)月)。
2.ph7.5磷酸鹽緩沖液:磷酸氫鈉: 稱取23.377g磷酸氫二鈉,加水溶解后定容至1l。磷酸二氫鉀:稱取9.078g磷酸二氫鉀,加水溶解后定容至1l。取上述磷酸氫二鉀溶液85ml和磷酸二氫鉀溶液15ml混合均勻。
操作方法
1.取樣按《茶 取樣》的規(guī)定取樣。
2.試樣的制備按《茶 磨碎試樣的制備及其干物質(zhì)含量測(cè)定》的規(guī)定,制備試樣。
3.測(cè)定步驟 (1)試液的制備按《茶 水浸出物測(cè)定》中的規(guī)定,制備試液。 (2)測(cè)定準(zhǔn)確吸取上述(1)試液1ml。
4.注入25ml的容量瓶中,加水4ml和酒石酸亞鐵溶液5ml,充分混合,再加ph7.5的緩沖液至刻度,用10mm比色杯,在波長(zhǎng)540nm處,以試劑空白溶液作參比,測(cè)定吸光度(a)。
5.結(jié)果計(jì)算 計(jì)算方法和公式茶葉中茶多酚的含量,以干態(tài)質(zhì)量百分率表示,按下式計(jì)算: a×1.957×2 l1 茶多酚(%)=──×──×100 100 l2×m×m 式中: l1——試液的總量,ml; l2——測(cè)定時(shí)的用液量,ml; m——試樣的質(zhì)量,g; m——試樣干物質(zhì)含量百分率,%; a——試樣的吸光度; 1.957——用10mm比色杯,當(dāng)吸光度等于0.50時(shí),每毫升茶湯中含茶多酚相當(dāng)于1.957mg。 如果符合重復(fù)性的要求,則取兩次測(cè)定的算術(shù)平均值作為結(jié)果。 重復(fù)性同一樣品的兩次測(cè)定值之差,每100g試樣不得超過0.5g。