入秋了，又到了吃棗的季節(jié)。棗果不僅是滋補佳品，也是一味傳統(tǒng)的中藥，并且棗中含有多種糖類。糖類是自然界中廣泛分布的一類重要的有機化合物，是一切生命體維持生命活動所需能量的主要來源。
在高效液相色譜儀(hplc)測試中，糖類的分子通常采用通用型檢測器檢測，如示差折光檢測器(ri)進行檢測。但采用ri檢測器有兩個明顯的缺點：靈敏度低、不能梯度洗脫。采用磷酸-苯肼柱后衍生法測定糖類，可以克服ri檢測器的以上兩個缺點。
下面我們使用日立chromaster高效液相色譜儀，利用磷酸-苯肼柱后衍生法進行糖類的分析。色譜柱將糖類分離，再與磷酸-苯肼溶液在高溫下反應，使用有選擇性，高靈敏度的熒光檢測器進行檢測，梯度洗脫可以多種糖成分同時分析。此方法克服了示差折光檢測器的靈敏度低和不能梯度洗脫的缺點。
■ 流路圖
儀器配置: chromaster 5110 泵，5210 自動進樣器，5310 柱溫箱，5410 uv檢測器，5510反應單元
■ 標準品測定例
■ 系統(tǒng)適用性（100 mg/l 糖標準混合液）
分別對硅膠基質和聚合物基質色譜柱的系統(tǒng)適用性進行評價，理論塔板數(shù)按蔗糖峰計算，分離度以葡萄糖和半乳糖的分離度計算，結果得到色譜柱的理論塔板數(shù)和分離度如上表所示。聚合物基質色譜柱的測定，理論塔板數(shù)較低，但色譜柱的壽命較長；硅膠基質色譜柱的測定，色譜峰的峰形尖銳，分離度改善很多。后續(xù)實驗均采用硅膠基質色譜柱。
■線性
以半乳糖和蔗糖為例，各種糖成分在10 ~ 500 mg/l標準混合液的濃度范圍內，r2 ≥ 0.9995，線性關系良好。
■ 重現(xiàn)性
■ 棗樣品的分析結果
對大棗樣品進行了糖成分的分析，結果在棗中檢測到果糖、葡萄糖和蔗糖成分，并且均得到很好的分離效果。