細(xì)胞名稱 人肺腺癌細(xì)胞;calu-3
形態(tài)特性 上皮樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞是從一名25歲的白人男性肺腺癌患者的胸水中分離建立的;該患者曾使用過(guò)*、*、*進(jìn)行治療。該細(xì)胞接種至裸鼠可成瘤;可作轉(zhuǎn)染宿主。
培養(yǎng)條件 mem-ebss: minimum essential medium (mem eagles with earle's balanced salts) 10%fbs
傳代方法 1:3~1:6傳代;每周2~3次。
傳代情況 c5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%dmso+20%fbs
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法(-)
str amelogenin:x;csf1po:11,12;d13s317:12;d16s539:12,14;d18s51:14,17;d19s433:12,13;d21s11:28,30;d2s1338:19;d3s1358:15,18;d5s818:11;d7s820:10,11;d8s1179:11,15;fga:25;th01:6,9.3;tpox:8;vwa:16,17;
同工酶
染色體 56~63,xx,有若干染色體易位
使用權(quán)限 a類
規(guī)格:70%密度的25cm2培養(yǎng)瓶的細(xì)胞一瓶
特點(diǎn):細(xì)胞代數(shù)為4代以內(nèi)
包裝:內(nèi)層無(wú)菌自封袋;防壓泡沫盒;外層防壓保溫氣泡袋;說(shuō)明書(shū)
細(xì)胞來(lái)源:atcc、sciencell、iclc
貨期:1-2周
運(yùn)輸方式:快遞運(yùn)輸
售后:收到細(xì)胞后12天,如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有質(zhì)量問(wèn)題(如污染,死亡,快遞運(yùn)輸?shù)仍颍r(shí),應(yīng)出具書(shū)面質(zhì)量問(wèn)題報(bào)告并及時(shí)傳真或致銷售人員,我們將盡快為您解決!
以下細(xì)胞處理方法及細(xì)胞說(shuō)明書(shū)僅供參考,具體操作還需要根據(jù)到貨時(shí)細(xì)胞密度,細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)等具體情況,酌情處理,如需要更詳細(xì)技術(shù)指導(dǎo),請(qǐng)及時(shí)或郵件。
需要特別指出的是:如細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題,請(qǐng)于48h內(nèi)及時(shí)反饋,本公司將竭誠(chéng)為您服務(wù)!
一.貼壁細(xì)胞
客戶接收到細(xì)胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過(guò)的)培養(yǎng)瓶外部。
肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100x ,200x 各一張)。
顯微鏡觀察細(xì)胞,當(dāng)細(xì)胞融匯至80%左右(可以傳代的情況下),細(xì)胞應(yīng)該在37度培養(yǎng)箱預(yù)溫1-2h后再做處理。如未達(dá)到細(xì)胞傳代密度,培養(yǎng)瓶應(yīng)預(yù)留一部分培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
嚴(yán)格無(wú)菌操作,打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),放入另一無(wú)菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞)。
用pbs 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面,加入適量的0.05%*-edta消化細(xì)胞,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落,加入終止液終止。
1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%co2 培養(yǎng)。
二.懸浮細(xì)胞
1. 接收到細(xì)胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過(guò)的)培養(yǎng)瓶外部。
2. 肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100x ,200x 各一張)。
3. 嚴(yán)格無(wú)菌操作,打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4. 將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒)。
5. 1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。 換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和新鮮培養(yǎng)基,37℃,5%co2 培養(yǎng)。
三.一毫升小管操作方法 小管內(nèi)也是此細(xì)胞。
1. 用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過(guò)的)。
2. 嚴(yán)格無(wú)菌操作,用吸管吸出管中細(xì)胞至9ml*培養(yǎng)基混勻。
3. 1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。
4.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%co2 培養(yǎng)